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FITC TRITC-Dextran 在肠通透性研究中的实验步骤
时间:2017-06-05 12:14:13

Dextan是一种无毒,不易降解的多糖,常用于肠通透性研究中,简单的步骤如下(小鼠为例)

 材料准备:

1 FITC-dextran (FD40), 或TRITC-Dextran用PBS配制成25mg/ml
2 96孔板(黑色),荧光仪专用
3 取血材料(毛细管...)
步骤:
1 将实验小鼠禁食4小时
2 按20ml/kg剂量喂食小鼠
3 禁食3小时
4 眼眶取血,离心收集血清。按需要比例用PBS稀释
5 制作标准曲线:为了统一系统,用正常血清与PBS配制FITC-Dextran系列浓度。
6 将50-100ul 加入96孔板,荧光仪下读数
7 根据标准曲线计算FITC-dextran浓度
注:取血量,可以根据自己的实验设计来进行
      近年来,研究人员更喜欢用TRITC-Dextran,原因是相对于FITC,TRITC对环境pH耐受性更好
      Dextran的分子量,对实验影响不大,但选40KD的比较多
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