CAR (G4S Linker) Antigen Density Quantitation Kit (PE)与Bangslabs的MESF(PE)有何不同?
Cell Signaling 公司的CAR(G4S Linker)抗原密度定量试剂盒(PE) 能够定量分析经过工程化改造、表达含有G4S linker的单链抗体可变片段(scFv)嵌合抗原受体(CAR)的细胞表面CAR表达水平。这个试剂盒的原理与Bangslabs的MESF(PE)原理是完全相同的。不同之处在于,该试剂盒配了PE 荧光标记一抗(G4S Linker (E7O2V) Rabbit mAb (PE Conjugate),所以应用范围窄; 而Bangslabs的MESF(PE)试剂盒需要用户根据自已的目标,选择一抗,适配性更好一些。
另外,Cell Signaling公司的该试剂盒认为抗体与抗原是单价结合的,而且一个抗体分子只结合了一个PE蛋白,因此测得的值就是抗原的绝对定量。而Bangslabs的抗体是不是单价与抗原结合,上面有多少个PE分子,需要根据具体的抗体来确认(不同厂家,可能不同),因此严格说来,还是相对定量。
Spherotech的RCP-05-05质控球(纳米流式)有无官方PMT模板?
Spherotech的网站上并未提供此类内容的正式模板。但厂家已利用 NIST ERF 珠子对数值进行了较准,以适用于 RCP-05-5 各组。Spherotech可提供如类似RCP-30-5A的定制模板。但需要您告知所涉及的具体仪器型号,以便可据此对模板进行相应调整。
QSC与MESF 试剂盒中的ABC值及MESF值是单个细胞或球的还是群组的?
单个细胞或球的。
Bangslabs网站上找不到所用流式细胞仪对应的Quickcal计算模板的,怎么办?
模板内置的计算公式以及参数都是一样的,因此所有QuickCal计算模板的结果是一样。不同在于显示的窗口不同,如果找不到你仪器对应的模板,您可以将所有的模板下载试用,看看哪个更符合您的习惯。
在用QSC kit时,抗体滴度确认达不到饱合
这一般是抗体非特异性的结合引起的。常见的就是曲线持续上升而不趋于平缓。球体本身是聚苯乙烯,上面有苯环,对疏水的蛋白有吸附作用。当然最快的结合肯定是二抗与一抗之间结合,但如果您的孵育时间过长,就会让一抗与二抗结合的同时,也会与球体结合。特别是一些蛋白荧光(如PE其分子量较大240kd,更容易与球体直接吸附)。解决的办法就是减少孵育的时间,孵育后多洗几次,或是换抗体和加点表活。
RiboLace seq 起始样品细胞数量最低是多少?
细胞的翻译水平不同,很难有一个准确的判断。一般认为最低所需要细胞量为300,000个。某些细胞,如卵细胞,所需要的会更少一些。拿不准的客户,可以咨询我们,事实上我们也有针对数量较少细胞的操作方案。
BioMag® BioMag Dextran-coated Charcoal 可以用来替代sigma的C6241吗?
sigma的C6241是Charcoal, dextran coated, 是不带磁性的,就是在木碳的外面包了葡聚糖。用于吸附小分子,小分可以通过葡聚糖dextran进入木炭内,而大分子不能。Bangslabs是在磁珠外面修饰了木炭,外面再加一层葡聚糖,这样的好处是吸附完后,可以通过磁场将磁珠吸附下来,除理起来更方便,而sigma 的可能需要过滤或是离心,不能自动化。
这让我想到大家都在找纯化质谱前处理磁珠,如果感兴趣,就来找我吧!
Spherotech的质控球UFRP-30-2可以保存多久?
厂家标示的是开瓶后1年,实际上用3年也是很正常的。每隔一年,厂家都会对库存的单峰球进行质控,从他们的经验来看3-5年是没有问题的。