为什么多峰球的弱峰比较宽？
2025-12-26
图1 Bangslabs Quantum™ QC，8 peak Beads
这是否意味着，在较暗的微球组中，有些微球含有较多的荧光团，而有些微球含有较少的荧光团，从而导致更高的变异性？事实并非如此。虽然较暗的峰的 CV 值确实较高，但该组内的每个球内部的染料量基本相同。
那么导致的原因又是什么？我们先来看流式细胞仪是如何记录光子数的。荧光通过光电倍增管产生光电子，并进一步将其放大为多个光电子，仪器记录的是在光电倍增管的阴极点的光电子数目。
在统计上，光子计数服从泊松分布，其方差就是其均值（𝜎^2=𝜆），标准差是方差的平方根(𝜎=𝜆^1/2)。通常测量到的光子数量n 接近于平均值λ ，所以方差（更准确地说是标准差）近似为n^1/2， 简单说来：给定 n 个事件（光子）的平均计数，计数的标准差可以确定为 √n。 变异系数百分比 (CV) ，定义为（标准差/平均值）× 100，也就是(√n/n)*100%。
由上我们很容易的看出，随着n（光子计数）的增加，√n（标准差）也在增加，但其CV值却是变小了（√n 与n的增长速度不同），下面列个表来展示说明：
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* 事件计数在此近似看为平均计数。
以上恰如其分地解释了为什么较暗的珠子比较亮的峰值具有更高的 CV。
弱峰之所以暗淡，是因为它们含有较少的荧光团，在光照过程中向光电阴极引入的光子也较少。由于光子数量少，计数误差较大；反之强峰的微球含较多的荧光分子，因此光子数量多，计数的误差小。
反应在具体的应用上，对于弱染色的细胞 ，因其CV高于强染色的细胞，所以可能我们在计数的时候，需要更多数量的细胞。
